Proprietà batteriostatiche biomatrici comuni patogeni ortopedici
Innesti tessuto ingegnerizzato rigenerazione tessuti cellule mature
cellule progenitrici seminate biomatrici ma sostegno sviluppo tessuto
biomateriali popolari chirurgia ortopedica collagene tipo I acido
ialuronico idrossiapatite acido polilattico-co-glicolico PLGA
biomatrici proprietà batteriostatiche utili promuovere sopravvivenza
innesto tessuto ingegnerizzato pazienti suscettibili infezione effetti
batteriostatici biomateriali crescita patogeni batterici ortopedici
comuni Staphylococcus Aureus Staphylococcus epidermidis Streptococco
beta emolitico Pseudomonas aeruginosa acido ialuronico maggiori
effetti batteriostatici patogeni crescita batterica in media % p =
idrossiapatite collagene rispettivamente PLGA batteriostasi bassa
inibizione media non significativo crescita Streptococco beta
emolitico e P aeruginosa trattamento pazienti ortopedici perdita
ossea trauma tumore anomalia congenita limitata capacità
rigenerazione ossea potenzialità complicazioni infezione progressi
ingegnerizzazione tissutale mezzi efficaci crescita tessuto
rigenerativo tecniche ingegnerizzazione tissutale biomateriali
tridimensionali biomatrici seminate cellule mature progenitrici
difetto biomateriale idoneo caratteristiche biochimiche distribuzione
cellula biocompatibilità biodegradabilità impedire sviluppo
fenotipico cellule target in vitro in vivo biomateriali popolari
matrici applicazioni ortopediche collagene di tipo I acido ialuronico
idrossiapatite polimeri lineari acido polilattico PLA acido
poliglicolico PGA copolimeri PLGA materiali proprietà mutevoli za
meccanica biocompatibilità pattern degradazione idrossiapatite
materiale ceramico fosfato calcio riparazione ossea impalcatura
superficie rivestimento protesi proprietà osteoconduttive tempo
degradazione biomateriali popolarità capacità promuovere crescita
ossea reazione immunologica granulomatosa fibrosa impianto trapianto
materiali rivestimento popolari polimeri collagene biomateriale
derivazione tissutale collagene tipo I costituente ossa pelle
tendini rivestimento ingegnerizzazione tissutale collagene espansore
innesto osseo proprietà osteoconduttive rivestimento deposizione
minerale acido ialuronico costituente fondamentale matrice
extracellulare cartilagine ialina componente solubile fluido
articolazione normale capacità significativa indurre mazione ossea
biocompatibile versatile tipi variabili rivestimenti crescente
popolarità materiale biomatrice PLGA classe copolimeri biodegradabili
proprietà meccaniche degradazione necessità clinica materiali
scarsa capacità indurre mazione osso biocompatibilità materiale
sutura versatilità costruzione rivestimento materiali PLGA ambiente
siliceo sito impianto induce risposta infiammatoria materiale matrice
ingegnerizzazione tissutale siti impianto pazienti ortopedici
infezione contaminazione perdita tessuto ischemia locale danno
vascolarizzazione vascolare significativo riduzione penetrazione
antibiotici associazione riduzione vascolarizzazione sangue studi
procedure chirurgiche rigenerative cellule biocompatibili incorporano
sostanze contaminazione batterica innesti tessuti ingegnerizzati
ferita circostante chirurgia ortopedica negativamente mazione
attaccamento tessuto connettivo tessuto osseo cartilagine
trattamento chirurgico fratture aperte probabilità contaminazione
batterica ambiente riparazione fratture aperte tecniche
ingegnerizzazione tissutale trauma perdita ossea distacco periostio
tessuti molli ischemia locale ischemia locale con infarto tessuto
danno vascolarizzazione combinata mazione ematoma crescita batteri
introduzione protesi mezzi di fissazione interna rischio infezione
introduzione materiale estraneo corpo prevenzione contenimento
contaminazione batterica sito ferita significativamente esito clinico
terapia ingegnerizzazione tissutale sviluppo biomatrice
rivestimento efficace crescita cellulare tessuti ingegnerizzati
batteriostatiche bio-materiale ideale chirurgia ortopedica
significativamente sopravvivenza innesto esito valutare potenziali
effetti batteriostatici materiali biomatrice crescita patogeni
batterici ortopedici comuni patogeni Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis Streptococco b-emolitico Pseudomonas
aeruginosa S aureus S epidermidis causa frequente infezioni protesi
effetto batteriostatico matrici batteri selezionati esistenza
proprietà antibatteriche biomateriali superiore guarigione ferita
capacità rigenerativa innesto Materiali metodi Preparazione
materiale matrice materiali matrice collagene tipo I Helistat
Integra Lifesciences Plainsboro New Jersey acido ialuronico Hyaff-11
Fidia Advanced Biopolymers Abano Terme Italia idrossiapatite
Collagraft Zimmer Warsaw Indiana acido polilattico-co-glicolico PLGA
lactel85/15 polyDL DL-lactideco- - glycolide Birmingham Polymers
Birmingham Alabama collagene acido ialuronico idrossiapatite
preparazioni disponibili commercio matrice PLGA 85% acido
poliglicolico 15% acido polilattico 200-300mm dimensione poro
polimeri disponibili in commercio miscela PLGA laboratorio matrice
tessuto Collagraft miscela perline porose composte 60% idrossiapatite
40% fosfato tricalcico cartilagine fibrillare bovina Helistat
collagene tendine profondo bovino fonti collagene tipo I ottenuto
dimensione clinicamente riparazione difetto profondità mm x mm x mm
strutture materiale matrice dimensioni cinque campioni materiale peso
medio materiale stardizzare campioni pesi materiali matrice
collagene mg acido ialuronico mg idrossiapatite mg PLGA mg collagene
acido ialuronico idrossiapatite sterili fabbricante
sterilizzati irradiazione g matrici preparato PLGA sterilizzate
lavaggio iniziale etanolo 100% 30 min lavaggi consecutivi 30 min
etanolo 70% matrici PLGA soluzione sterile salina tamponata con
fosfato metodo sterilizzazione etanolo lli matrice brodo
matrici sterili risultati materiali sterili pozzetti singoli
piastra coltura 24 pozzetti materiale cappa pressione positiva
prevenire contaminazione materiale llo Ceppi batterici batteri S
Aureus ATCC 29923 S epidermidis ATCC 12228 Streptococco b-emolitico
ATCC 19615 P aeruginosa ATCC 27853 organismi pattern suscettibilità
ceppi insoliti ceppi coltivati aerobicamente 37°_su piastre agar
sangue BBL Media Becton-Dickinson Microbiology Systems inoculo
iniziale 15 x 108 organismi millilitro preparati brodo
Mueller-Hinton misurazioni densità ottica soluzioni stock
solution batteri concentrazione 103 organismi millilitro Set-up
sperimentale esperimento triplice materiale matrice combinazione
batteri campione materiale inoculato 100ml stock solution
batteriche lli batterici separati matrice lli matrice brodo
batteri campioni microlitri llo batterico piastrati piastre agar
sangue numero iniziale batteri millilitro piastra agar sangue piastre
24 pozzetti incubate 37°C condizioni aerobiche CO2 5% corso
esperimento Determinazione attività batteriostatica effetto
antimicrobico biomateriali determinato conta batteri vitali
esposizione biomateriali 16 12 h raccolta campioni colture
sperimentali lli ansa loop 1ml inoculare piastre agar sangue
procedura inoculazione totale 2ml prelievo campione pozzetti
campione ansa sterile minimo “effetto prato” batterio campioni
materiale piastre incubato 24 h conta colonia P aeruginosa
conta accurata colonia 12h crescita piastre capacità contate
numero colonie unità CFU Colony ming Units CFU convertito numero
organismi millilitro proprietà batteriostatiche crescita campione
materiale matrice batteri lli batteri termine “Batteriostatico”
inibizione crescita batterica condizione sperimentale Analisi
statistica media tre misurazioni condizione sperimentale llo
valore esito stime curve crescita analisi statistica analisi
regressione curve crescita tipo batterico combinazione trattamento
matrice regressione termine lineare quadratico condizione
sperimentale tipo batterio intercetta equazioni regressione fit
esame grafico valori osservati previsti correlazione P aeruginosa
analisi sei ore soppressione percentuale crescita determinata
area curve crescita condizione lli batterici termine analisi tasso
crescita curva crescita termine crescita strumento valutare tasso
medio soppressione ponderazione singoli ceppi batteri t test
confronto batterio llo sperimentali significanza statistica p tasso crescita veloce tempo raddoppio 73 min S epidermidis
crescita lenta tempo raddoppio 110 min studio contaminazione
incrociata batteri culture batteriche vitali periodo fine analisi
lli matrice batteri crescita batterica studio materiali sterili
esposizione effetto puramente battericida ceppi batterici S aureus S
epidermidis Streptococco b-emolitico effetto batteriostatico
soppressione P aeruginosa conta batteri dodici ore S aureus S
epidermidis Streptococco b-emolitico colture P aeruginosa curve
crescita condizioni sperimentali collagene tipo I S epidermidis
Streptococco b-emolitico S aureus significanza statistica % ± p =
acido ialuronico proprietà batteriostatiche significative organismi
acido ialuronico effetto batteriostatico statisticamente significativo
ceppi batterici P aeruginosa trend soppressione P aeruginosa proprietà
batteriostatiche statisticamente significative trend di soppressione
impatto significativo crescita biomatrici innesti tessuto
ingegnerizzato cellule seminate sopra matrici siti impianto pazienti
ortopedici sono sp suscettibili infezione contaminazione perdita
tessuto ischemia locale danno vascolarizzazione integrità impianto
patogeni infezioni fratture aperte biomatrice sopprimere inibire
crescita patogeni maniera significativa esiti clinici Curve
crescita curve crescita normali P aeruginosa tasso crescita rapido
batteri S epidermidis lento numero batteri/mL ore coltura tasso
soppressione negativa crescita batteri accelerata matrice
Pseudomonas aeruginosa tasso soppressione negativa effetto
batteriostatico statisticamente significativo S aureus numero
batteri/mL ore coltura Curve crescita Staphylococcus epidermidis
biomatrici effetto batteriostatico statisticamente significativo S
epidermidis valori p Curve crescita Streptococco b-emolitico acido
ialuronico collagene effetto batteriostatico statisticamente
significativo Streptococco b-emolitico PLGA significativamente
crescita Streptococco b-emolitico numero di batteri/mL ore di coltura
Curve di crescita Pseudomonas aeruginosa idrossiapatite unico effetto
batteriostatico significativo P aeruginosa acido ialuronico trend
batteriostatico PLGA accelerato significativamente crescita P
aeruginosa trend accelerazione crescita numero batteri/mL ore
di coltura integrazione protesica tessuto ospite “gara per la
superficie” cellule ospite batteri proprietà materiali promuovere
crescita tessuto materiale suscettibile invasioni batteriche
proprietà materiali composizione carica superficiale morfologia
superficiale struttura chimica ph pressione osmotica concentrazione
ionica area circonda impianto influenzano microambiente superficie
materiale cellule ospite batteri impianto protesico batteri
biomateriali batteriostatici crescita patogeni combinazione risposta
immunitaria adeguata ospite effetto batteriostatico biomatrice
prevenzione infezione clinicamente significativa potenzialmente
struttura tessuto ingegnerizzato numero materiali proprietà
batteriostatiche batteriostasi_ inibizione soppressione crescita
normale tempo stard tempo materiale inibire sopprimere crescita
batteriostatico Studi precedenti materiali matrice extra-cellulare
sottomucosa intestino tenue vescica urinaria maiale attività
antimicrobica Escherichia Coli S aureus riduzione attività
substrato rivestito livelli diversi fibronectina S epidermidis
densità proteine ligi superficie vetro bioattivo dimostrato
attività antimicrobica Actinobacillus actinomycetemcomitans
Porphyromonas Gingivalis Actinomyces naeslundii Streptococcus mutans
Streptococcus sanguis tempo di osservazione 12 h effetto
batteriostatico impianto effetto batteriostatico corpo difesa
naturale prevenire colonizzazione batterica sito impianto
biomateriali esaminati in studio mostrato effetti diversi
crescita batteri acido ialuronico effetto batteriostatico maggiore
batteri pratica ortopedica acido ialuronico effetto
batteriostatico patogeni cavità orale proprietà
batteriostatiche saturazione enzima ialuronato liasi prodotto
batteri difese fisiche ospite ialuronato liasi fattore
propagazione batteri patogeni catalizza degradazione acido
ialuronico condroitinsolfati b-eliminazione enzimatica acido
ialuronico matrice extracellulare degradazione batterica
espansione batteri ceppi Streptococcus Streptococco b-emolitico
Propionibacterium PeptoStreptococcus Staphylococcus Streptomyces
permeabilità tessuto ruolo nziale infezioni ferite polmonite sepsi
colture Streptococcus Pneumoniae ialuronato liasi mezzi liquidi
frazioni associate cellula enzima circolante invasione batterica
interno ospite effetto batteriostatico acido ialuronico
saturazione ialuronato liasi batterica acido ialuronico batterio
livelli elevati permeabilità tessuto capacità sistema immunitario
ospite patogeni molecole acido ialuronico rete casuale catene
setaccio diffusione batteri matrici effetto batteriostatico
inferiore idrossiapatite ceramica fosfato calcio effetti
batteriostatici significativi S epidermidis P aeruginosa S
epidermidis idrossiapatite inibizione accelerazione crescita S
aureus risultati differenze proprietà idrossiapatite composizione
processo lavorazione studio dimostrato idrossiapatite superficie
caricata negativamente aumento adesione tasso proliferazione batterio
interazione elettrostatica superficie cellula superficie
idrossiapatite soppressione effetto carica materiale ioni materiale
quantità materiale numero batteri inoculazione matrici collagene
tipo I popolari ingegnerizzazione tissutale capacità matrice
collagene tipo I osso matrici collagene crescita Streptococco
b-emolitico S epidermidis meccanismo soppressione crescita S
aureus paragonabile S aureus molecola di adesione al collagene
diretta gene cna tessuti alta concentrazione collagene cartilagine
osso infezione Staphylococcus rivestimenti collagene tipo I
matrici PLGA ambiente acido degrada meccanismo di soppressione S
aureus pratica ortopedica PLGA bacteriostasi minima livello di
soppressione dipendente singoli batteri biomatrice sopravvivenza
innesto tessuto ingegnerizzato arco temporale concentrazioni
iniziali ceppi batterici batteri anaerobici common Tissue-engineered
grafts tissue regeneration mature progenitor cells seeded onto shape
support loping tissue Popular surgery collagen type I ialuronic acid
idrossiapatite polylactic polyglycolic acid PLGA Biomatrici
batteriostatiche properties promoting tissue-engineered graft survival
patients susceptible infection growth bacterial inhibiting bacterial
growth average bacteriostasis average inhibition NS Treatment
ortopedici patients bone loss trauma tumor congenital anomaly
secondary limited bone regenerative capacity potential complications
such as infection Recent advancements tissue engineering means
regenerative tissue growth tissue engineering techniques
three-dimensional biomateriali mature o progenitor cells shape help
guide tissue lopment suitable initial biochimiche characteristics
cell distribution biodegradability hinder phenotypic lopment target
cells in vitro in vivo linear polymers polylactic acid PLA
polyglycolic acid PGA copolimeri PLGA varying properties mechanical
strength biocompatibilità degradation pattern Idrossiapatite calcium
phosphate ceramic material bone repair surface coating prostics ospite
conductive properties longer degradation time bio-materials ability
promote bone growth induce immunologic granulomatous brous reaction
implant materials polymers Collagen tissue-derived biomateriale Type
I collagen major constituent bone skin tendons popular choice
tissue-engineering rivestimento Collagen bone graft properties
suitable rivestimento mineral deposition ialuronico acid a major
constituent extracellulare matrix is a central element hyaline
cartilage is found as a soluble component normal joint signicant
ability bone mation biocompatibile variable types rivestimento
biomatrice material PLGA of biodegradable copolimeri mulated various
mechanical degradation properties clinical need materials ability
bone mation biocompatibilità history safe suture materials
versatility constructing rivestimento A problem PLGA materials
acidic environment implant site infiammatoria response consensus
tissue engineering Implantation sites ortopedici patients susceptible
infection contamination tissue loss local ischemia damaged vascular
supplì Decreased penetration antibiotici association blood supply
significant problem regenerative surgical procedures biocompatibile
cell embedding substances bacterial contamination tissue-engineered
graft surrounding wound surgery new connective tissue attachment
bone cartilage surgical treatment open fractures likelihood bacterial
contamination bone exposed environment Repair open fractures area
tissue-engineering techniques accommodating bone loss stripping
periospiteum soft tissues local ischemia Local ischemia tissue
infarction damaged vascular supply combined hematoma formation
promote growth bacteria infection introduction internal hardware
risk of infection introduction foreign material body Prevention
containment bacterial contamination wound site significativamente
improve clinical outcome tissue engineering lopment biomatrix
effective rivestimento tissue-engineered cell growth batteriostatiche
ideal bio-material use ortopedici surgery significativamente graft
survival outcome purpose study evaluate potential batteriostatiche
bio-matrix materials growth bacterial patogeni Staphylococcus
aureus Staphylococcus epidermidis emolitico Streptococco Pseudomonas
aeruginosa S aureus S epidermidis frequent cause antibacterial
properties wound healing regenerative capability graft collagen
type I Helistat Integra Lifesciences Plainsboro New Jersey ialuronico
acid Hya-11 Fidia Advanced Biopolymers Abano Terme Italy
idrossiapatite Collagraft Zimmer Warsaw Indiana polylactic
polyglycolic acid PLGA lactel85/15 polyDL DL-lactideco-glycolide
Birmingham Polymers Birmingham Alabama collagen ialuronico acid
idrossiapatite commercially available preparations PLGA matrix
polyglycolic 15% polylactic acid 200–300lm pore size laboratory
Collagraft product mixture porous beads 60% idrossiapatite 40%
tricalcium phosphate bovine cartilage Helistat collagen bovine deep
tendon purest sources Type I collagen size defect repair 5mm ·
5mm · 2mm deep matrix material size samples material weighn order to
determine an average weight material weights matrix materials
standardize samples collagen 2mg ialuronico acid mg idrossiapatite
mg PLGA mg collagen ialuronico acid idrossiapatite sterile
manufacturer sterilized irradiation prepared PLGA matrici
sterilized initial h 100% etanolo consecutive % etanolo PLGA matrici
sterile phosphate saline method sterilization methods sterilization
etanolo broth matrici sterile sterile materials individual wells
96-well culture plate Preparation material positive pressure hood
contamination material triplicate bacterium Bacterial strains
bacteria study S aureus ATCC 29923 S epidermidis ATCC 12228
emolitico Streptococco ATCC 19615 P aeruginosa ATCC 27853 organisms
common laboratory organisms susceptibility patterns strains strains
grown aerobically 37 blood agar plates BBL Media Becton–Dickinson
Microbiology Systems inoculum 15 · 108 organisms per milliliter
Mueller–Hinton broth optical density measurement solutions stock
solution bacteria species concentration organisms milliliter
Experimental setup experiment run in triplicate matrix material
bacteria combination material sample inoculated bacterial stock
solutions Separate bacterial matrix matrix broth bacteria run
microliter samples bacterial plated blood agar plates starting
number bacteria milliliter blood agar plates 96-well plates
incubated 37_C aerobic conditions 5% CO2 course experiment
Determination batteriostatiche activity antimicrobial effect
various biomateriali count viable bacteria exposure biomateriali
Sample collections experimental cultures made loop used inoculate
blood agar plates procedure repeated giving total inoculation sample
wells sample stirred sterile loop lawn effect bacteria material
samples colony count plates incubated 24h P aeruginosa accurate
colony count growth plates surpassed ability count number colony
units CFUs number CFUs number organisms millilitre batteriostatiche
properties growth sample containing matrix material bacteria
bacteria Batteriostatiche inhibition bacterial growth experimental
condition Statistical analysis mean three measurements experimental
condition outcome value Estimates growth curves statistical
analysis regression analysis Growth curves separately bacterial
type matrix treatment combination regression possibility linear
quadratic term experimental condition bacteria type treatments
intercept regression equations model determined graphical
examination observed predicted values treatment types
correlation calculated P aeruginosa analysis values ability count
CFUs bacteria analysis percent growth suppression determined
area under growth curves condition compared bacteria end point
analysis area under growth curve end-point growth measure rate
growth average rate suppression bacteria strains calculated data
weighting individual strains bacteria used analysis t test
against experimental conditions Statistical significance pResults discussion strains not exposed to matrix exhibited normal
growth curves fastest growth rate doubling time approximately 73min
slowest growth doubling time approximately no cross-contamination
bacteria bacterial cultures viable during period evaluated end
analysis matrix no bacteria free of bacterial growth during
materials sterile experiment assessment bacterial growth presence
matrix materials illustrated materials growth exposure matrix
materials exhibited purely bactericidal bacterial strains growth
culture varying degrees matrix materials batteriostatiche suppression
P aeruginosa time point times growth bacteria ability materials
growth bacterial counts cultures matrix materials impacted
tissue-engineered grafts integration ospite tissue surface ospite
cells surface charge surface morphology chemical structure pH
osmotic pressure ionic concentration area surrounding implant
microenvironment material surface ospite cells bacteria bacteria
implantation batteriostatiche biomateriali partially suppress growth
patogeni adequate immune response ospite batteriostatiche
biomatrice clinically significant infection construct materials
batteriostatiche properties inhibition suppression cellular matrix
materials intestinal submucosa urinary bladder submucosa
antimicrobial activity density proteins surface bioactive glass
antimicrobial activity Porphyromonas gingivalis Actinomyces naeslundii
Streptococco mutans Streptococco sanguis timeframes implantation
natural defense colonization oral cavity saturation enzyme
hyluronate physical enzymatic b-elimination process extracellulare
matrix bacterial degradation pneumonia sepsis liquid media
cell-associated fractions circulating enzyme bacterial invasion lyase
bacteria elevated levels tissue permeability chains sieve spread
bacteria calcium phosphate ceramic displayed significant
batteriostatiche effects manufacturing processing negatively charged
surface adhesion proliferation rate bacteria attributed electrostatic
interaction cell surface surface Suppression material charge ions
ling material amount material overwhelming number bacteria
inoculation Collagen I tissue engineering ability incorporate type I
collagen matrix regenerate bone Collagen growth b-emolitico
Streptococco S epidermidis mechanism suppression growth S aureus
collagen adhesion molecule directed cna gene bacteria PLGA matrici
growth bemolitico Streptococco P aeruginosa PLGA acidic environment
conducive growth bacteria mechanism suppression S aureus unknown
summary ialuronico acid patogeni ortopedici practice PLGA exhibited
bacteriostasis actually accelerated growth b-emolitico Streptococco P
aeruginosa idrossiapatite collagen batteriostatiche level
suppression dependent individual bacteria Selection biomatrice
batteriostatiche beneficial promoting tissue-engineered graft survival
patients susceptible infection wound contamination tissue loss local
ischemia studies time course initial concentrations bacteria
bacterial strains including anaerobic bacteria Soluzione satura di
tiosolfato di sodio temini statistici varianza tra gruppi varianza
entro gruppi
Innesti tessuto ingegnerizzato rigenerazione tessuti cellule mature
cellule progenitrici seminate biomatrici ma sostegno sviluppo tessuto
biomateriali popolari chirurgia ortopedica collagene tipo I acido
ialuronico idrossiapatite acido polilattico-co-glicolico PLGA
biomatrici proprietà batteriostatiche utili promuovere sopravvivenza
innesto tessuto ingegnerizzato pazienti suscettibili infezione effetti
batteriostatici biomateriali crescita patogeni batterici ortopedici
comuni Staphylococcus Aureus Staphylococcus epidermidis Streptococco
beta emolitico Pseudomonas aeruginosa acido ialuronico maggiori
effetti batteriostatici patogeni crescita batterica in media % p =
idrossiapatite collagene rispettivamente PLGA batteriostasi bassa
inibizione media non significativo crescita Streptococco beta
emolitico e P aeruginosa trattamento pazienti ortopedici perdita
ossea trauma tumore anomalia congenita limitata capacità
rigenerazione ossea potenzialità complicazioni infezione progressi
ingegnerizzazione tissutale mezzi efficaci crescita tessuto
rigenerativo tecniche ingegnerizzazione tissutale biomateriali
tridimensionali biomatrici seminate cellule mature progenitrici
difetto biomateriale idoneo caratteristiche biochimiche distribuzione
cellula biocompatibilità biodegradabilità impedire sviluppo
fenotipico cellule target in vitro in vivo biomateriali popolari
matrici applicazioni ortopediche collagene di tipo I acido ialuronico
idrossiapatite polimeri lineari acido polilattico PLA acido
poliglicolico PGA copolimeri PLGA materiali proprietà mutevoli za
meccanica biocompatibilità pattern degradazione idrossiapatite
materiale ceramico fosfato calcio riparazione ossea impalcatura
superficie rivestimento protesi proprietà osteoconduttive tempo
degradazione biomateriali popolarità capacità promuovere crescita
ossea reazione immunologica granulomatosa fibrosa impianto trapianto
materiali rivestimento popolari polimeri collagene biomateriale
derivazione tissutale collagene tipo I costituente ossa pelle
tendini rivestimento ingegnerizzazione tissutale collagene espansore
innesto osseo proprietà osteoconduttive rivestimento deposizione
minerale acido ialuronico costituente fondamentale matrice
extracellulare cartilagine ialina componente solubile fluido
articolazione normale capacità significativa indurre mazione ossea
biocompatibile versatile tipi variabili rivestimenti crescente
popolarità materiale biomatrice PLGA classe copolimeri biodegradabili
proprietà meccaniche degradazione necessità clinica materiali
scarsa capacità indurre mazione osso biocompatibilità materiale
sutura versatilità costruzione rivestimento materiali PLGA ambiente
siliceo sito impianto induce risposta infiammatoria materiale matrice
ingegnerizzazione tissutale siti impianto pazienti ortopedici
infezione contaminazione perdita tessuto ischemia locale danno
vascolarizzazione vascolare significativo riduzione penetrazione
antibiotici associazione riduzione vascolarizzazione sangue studi
procedure chirurgiche rigenerative cellule biocompatibili incorporano
sostanze contaminazione batterica innesti tessuti ingegnerizzati
ferita circostante chirurgia ortopedica negativamente mazione
attaccamento tessuto connettivo tessuto osseo cartilagine
trattamento chirurgico fratture aperte probabilità contaminazione
batterica ambiente riparazione fratture aperte tecniche
ingegnerizzazione tissutale trauma perdita ossea distacco periostio
tessuti molli ischemia locale ischemia locale con infarto tessuto
danno vascolarizzazione combinata mazione ematoma crescita batteri
introduzione protesi mezzi di fissazione interna rischio infezione
introduzione materiale estraneo corpo prevenzione contenimento
contaminazione batterica sito ferita significativamente esito clinico
terapia ingegnerizzazione tissutale sviluppo biomatrice
rivestimento efficace crescita cellulare tessuti ingegnerizzati
batteriostatiche bio-materiale ideale chirurgia ortopedica
significativamente sopravvivenza innesto esito valutare potenziali
effetti batteriostatici materiali biomatrice crescita patogeni
batterici ortopedici comuni patogeni Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis Streptococco b-emolitico Pseudomonas
aeruginosa S aureus S epidermidis causa frequente infezioni protesi
effetto batteriostatico matrici batteri selezionati esistenza
proprietà antibatteriche biomateriali superiore guarigione ferita
capacità rigenerativa innesto Materiali metodi Preparazione
materiale matrice materiali matrice collagene tipo I Helistat
Integra Lifesciences Plainsboro New Jersey acido ialuronico Hyaff-11
Fidia Advanced Biopolymers Abano Terme Italia idrossiapatite
Collagraft Zimmer Warsaw Indiana acido polilattico-co-glicolico PLGA
lactel85/15 polyDL DL-lactideco- - glycolide Birmingham Polymers
Birmingham Alabama collagene acido ialuronico idrossiapatite
preparazioni disponibili commercio matrice PLGA 85% acido
poliglicolico 15% acido polilattico 200-300mm dimensione poro
polimeri disponibili in commercio miscela PLGA laboratorio matrice
tessuto Collagraft miscela perline porose composte 60% idrossiapatite
40% fosfato tricalcico cartilagine fibrillare bovina Helistat
collagene tendine profondo bovino fonti collagene tipo I ottenuto
dimensione clinicamente riparazione difetto profondità mm x mm x mm
strutture materiale matrice dimensioni cinque campioni materiale peso
medio materiale stardizzare campioni pesi materiali matrice
collagene mg acido ialuronico mg idrossiapatite mg PLGA mg collagene
acido ialuronico idrossiapatite sterili fabbricante
sterilizzati irradiazione g matrici preparato PLGA sterilizzate
lavaggio iniziale etanolo 100% 30 min lavaggi consecutivi 30 min
etanolo 70% matrici PLGA soluzione sterile salina tamponata con
fosfato metodo sterilizzazione etanolo lli matrice brodo
matrici sterili risultati materiali sterili pozzetti singoli
piastra coltura 24 pozzetti materiale cappa pressione positiva
prevenire contaminazione materiale llo Ceppi batterici batteri S
Aureus ATCC 29923 S epidermidis ATCC 12228 Streptococco b-emolitico
ATCC 19615 P aeruginosa ATCC 27853 organismi pattern suscettibilità
ceppi insoliti ceppi coltivati aerobicamente 37°_su piastre agar
sangue BBL Media Becton-Dickinson Microbiology Systems inoculo
iniziale 15 x 108 organismi millilitro preparati brodo
Mueller-Hinton misurazioni densità ottica soluzioni stock
solution batteri concentrazione 103 organismi millilitro Set-up
sperimentale esperimento triplice materiale matrice combinazione
batteri campione materiale inoculato 100ml stock solution
batteriche lli batterici separati matrice lli matrice brodo
batteri campioni microlitri llo batterico piastrati piastre agar
sangue numero iniziale batteri millilitro piastra agar sangue piastre
24 pozzetti incubate 37°C condizioni aerobiche CO2 5% corso
esperimento Determinazione attività batteriostatica effetto
antimicrobico biomateriali determinato conta batteri vitali
esposizione biomateriali 16 12 h raccolta campioni colture
sperimentali lli ansa loop 1ml inoculare piastre agar sangue
procedura inoculazione totale 2ml prelievo campione pozzetti
campione ansa sterile minimo “effetto prato” batterio campioni
materiale piastre incubato 24 h conta colonia P aeruginosa
conta accurata colonia 12h crescita piastre capacità contate
numero colonie unità CFU Colony ming Units CFU convertito numero
organismi millilitro proprietà batteriostatiche crescita campione
materiale matrice batteri lli batteri termine “Batteriostatico”
inibizione crescita batterica condizione sperimentale Analisi
statistica media tre misurazioni condizione sperimentale llo
valore esito stime curve crescita analisi statistica analisi
regressione curve crescita tipo batterico combinazione trattamento
matrice regressione termine lineare quadratico condizione
sperimentale tipo batterio intercetta equazioni regressione fit
esame grafico valori osservati previsti correlazione P aeruginosa
analisi sei ore soppressione percentuale crescita determinata
area curve crescita condizione lli batterici termine analisi tasso
crescita curva crescita termine crescita strumento valutare tasso
medio soppressione ponderazione singoli ceppi batteri t test
confronto batterio llo sperimentali significanza statistica p tasso crescita veloce tempo raddoppio 73 min S epidermidis
crescita lenta tempo raddoppio 110 min studio contaminazione
incrociata batteri culture batteriche vitali periodo fine analisi
lli matrice batteri crescita batterica studio materiali sterili
esposizione effetto puramente battericida ceppi batterici S aureus S
epidermidis Streptococco b-emolitico effetto batteriostatico
soppressione P aeruginosa conta batteri dodici ore S aureus S
epidermidis Streptococco b-emolitico colture P aeruginosa curve
crescita condizioni sperimentali collagene tipo I S epidermidis
Streptococco b-emolitico S aureus significanza statistica % ± p =
acido ialuronico proprietà batteriostatiche significative organismi
acido ialuronico effetto batteriostatico statisticamente significativo
ceppi batterici P aeruginosa trend soppressione P aeruginosa proprietà
batteriostatiche statisticamente significative trend di soppressione
impatto significativo crescita biomatrici innesti tessuto
ingegnerizzato cellule seminate sopra matrici siti impianto pazienti
ortopedici sono sp suscettibili infezione contaminazione perdita
tessuto ischemia locale danno vascolarizzazione integrità impianto
patogeni infezioni fratture aperte biomatrice sopprimere inibire
crescita patogeni maniera significativa esiti clinici Curve
crescita curve crescita normali P aeruginosa tasso crescita rapido
batteri S epidermidis lento numero batteri/mL ore coltura tasso
soppressione negativa crescita batteri accelerata matrice
Pseudomonas aeruginosa tasso soppressione negativa effetto
batteriostatico statisticamente significativo S aureus numero
batteri/mL ore coltura Curve crescita Staphylococcus epidermidis
biomatrici effetto batteriostatico statisticamente significativo S
epidermidis valori p Curve crescita Streptococco b-emolitico acido
ialuronico collagene effetto batteriostatico statisticamente
significativo Streptococco b-emolitico PLGA significativamente
crescita Streptococco b-emolitico numero di batteri/mL ore di coltura
Curve di crescita Pseudomonas aeruginosa idrossiapatite unico effetto
batteriostatico significativo P aeruginosa acido ialuronico trend
batteriostatico PLGA accelerato significativamente crescita P
aeruginosa trend accelerazione crescita numero batteri/mL ore
di coltura integrazione protesica tessuto ospite “gara per la
superficie” cellule ospite batteri proprietà materiali promuovere
crescita tessuto materiale suscettibile invasioni batteriche
proprietà materiali composizione carica superficiale morfologia
superficiale struttura chimica ph pressione osmotica concentrazione
ionica area circonda impianto influenzano microambiente superficie
materiale cellule ospite batteri impianto protesico batteri
biomateriali batteriostatici crescita patogeni combinazione risposta
immunitaria adeguata ospite effetto batteriostatico biomatrice
prevenzione infezione clinicamente significativa potenzialmente
struttura tessuto ingegnerizzato numero materiali proprietà
batteriostatiche batteriostasi_ inibizione soppressione crescita
normale tempo stard tempo materiale inibire sopprimere crescita
batteriostatico Studi precedenti materiali matrice extra-cellulare
sottomucosa intestino tenue vescica urinaria maiale attività
antimicrobica Escherichia Coli S aureus riduzione attività
substrato rivestito livelli diversi fibronectina S epidermidis
densità proteine ligi superficie vetro bioattivo dimostrato
attività antimicrobica Actinobacillus actinomycetemcomitans
Porphyromonas Gingivalis Actinomyces naeslundii Streptococcus mutans
Streptococcus sanguis tempo di osservazione 12 h effetto
batteriostatico impianto effetto batteriostatico corpo difesa
naturale prevenire colonizzazione batterica sito impianto
biomateriali esaminati in studio mostrato effetti diversi
crescita batteri acido ialuronico effetto batteriostatico maggiore
batteri pratica ortopedica acido ialuronico effetto
batteriostatico patogeni cavità orale proprietà
batteriostatiche saturazione enzima ialuronato liasi prodotto
batteri difese fisiche ospite ialuronato liasi fattore
propagazione batteri patogeni catalizza degradazione acido
ialuronico condroitinsolfati b-eliminazione enzimatica acido
ialuronico matrice extracellulare degradazione batterica
espansione batteri ceppi Streptococcus Streptococco b-emolitico
Propionibacterium PeptoStreptococcus Staphylococcus Streptomyces
permeabilità tessuto ruolo nziale infezioni ferite polmonite sepsi
colture Streptococcus Pneumoniae ialuronato liasi mezzi liquidi
frazioni associate cellula enzima circolante invasione batterica
interno ospite effetto batteriostatico acido ialuronico
saturazione ialuronato liasi batterica acido ialuronico batterio
livelli elevati permeabilità tessuto capacità sistema immunitario
ospite patogeni molecole acido ialuronico rete casuale catene
setaccio diffusione batteri matrici effetto batteriostatico
inferiore idrossiapatite ceramica fosfato calcio effetti
batteriostatici significativi S epidermidis P aeruginosa S
epidermidis idrossiapatite inibizione accelerazione crescita S
aureus risultati differenze proprietà idrossiapatite composizione
processo lavorazione studio dimostrato idrossiapatite superficie
caricata negativamente aumento adesione tasso proliferazione batterio
interazione elettrostatica superficie cellula superficie
idrossiapatite soppressione effetto carica materiale ioni materiale
quantità materiale numero batteri inoculazione matrici collagene
tipo I popolari ingegnerizzazione tissutale capacità matrice
collagene tipo I osso matrici collagene crescita Streptococco
b-emolitico S epidermidis meccanismo soppressione crescita S
aureus paragonabile S aureus molecola di adesione al collagene
diretta gene cna tessuti alta concentrazione collagene cartilagine
osso infezione Staphylococcus rivestimenti collagene tipo I
matrici PLGA ambiente acido degrada meccanismo di soppressione S
aureus pratica ortopedica PLGA bacteriostasi minima livello di
soppressione dipendente singoli batteri biomatrice sopravvivenza
innesto tessuto ingegnerizzato arco temporale concentrazioni
iniziali ceppi batterici batteri anaerobici common Tissue-engineered
grafts tissue regeneration mature progenitor cells seeded onto shape
support loping tissue Popular surgery collagen type I ialuronic acid
idrossiapatite polylactic polyglycolic acid PLGA Biomatrici
batteriostatiche properties promoting tissue-engineered graft survival
patients susceptible infection growth bacterial inhibiting bacterial
growth average bacteriostasis average inhibition NS Treatment
ortopedici patients bone loss trauma tumor congenital anomaly
secondary limited bone regenerative capacity potential complications
such as infection Recent advancements tissue engineering means
regenerative tissue growth tissue engineering techniques
three-dimensional biomateriali mature o progenitor cells shape help
guide tissue lopment suitable initial biochimiche characteristics
cell distribution biodegradability hinder phenotypic lopment target
cells in vitro in vivo linear polymers polylactic acid PLA
polyglycolic acid PGA copolimeri PLGA varying properties mechanical
strength biocompatibilità degradation pattern Idrossiapatite calcium
phosphate ceramic material bone repair surface coating prostics ospite
conductive properties longer degradation time bio-materials ability
promote bone growth induce immunologic granulomatous brous reaction
implant materials polymers Collagen tissue-derived biomateriale Type
I collagen major constituent bone skin tendons popular choice
tissue-engineering rivestimento Collagen bone graft properties
suitable rivestimento mineral deposition ialuronico acid a major
constituent extracellulare matrix is a central element hyaline
cartilage is found as a soluble component normal joint signicant
ability bone mation biocompatibile variable types rivestimento
biomatrice material PLGA of biodegradable copolimeri mulated various
mechanical degradation properties clinical need materials ability
bone mation biocompatibilità history safe suture materials
versatility constructing rivestimento A problem PLGA materials
acidic environment implant site infiammatoria response consensus
tissue engineering Implantation sites ortopedici patients susceptible
infection contamination tissue loss local ischemia damaged vascular
supplì Decreased penetration antibiotici association blood supply
significant problem regenerative surgical procedures biocompatibile
cell embedding substances bacterial contamination tissue-engineered
graft surrounding wound surgery new connective tissue attachment
bone cartilage surgical treatment open fractures likelihood bacterial
contamination bone exposed environment Repair open fractures area
tissue-engineering techniques accommodating bone loss stripping
periospiteum soft tissues local ischemia Local ischemia tissue
infarction damaged vascular supply combined hematoma formation
promote growth bacteria infection introduction internal hardware
risk of infection introduction foreign material body Prevention
containment bacterial contamination wound site significativamente
improve clinical outcome tissue engineering lopment biomatrix
effective rivestimento tissue-engineered cell growth batteriostatiche
ideal bio-material use ortopedici surgery significativamente graft
survival outcome purpose study evaluate potential batteriostatiche
bio-matrix materials growth bacterial patogeni Staphylococcus
aureus Staphylococcus epidermidis emolitico Streptococco Pseudomonas
aeruginosa S aureus S epidermidis frequent cause antibacterial
properties wound healing regenerative capability graft collagen
type I Helistat Integra Lifesciences Plainsboro New Jersey ialuronico
acid Hya-11 Fidia Advanced Biopolymers Abano Terme Italy
idrossiapatite Collagraft Zimmer Warsaw Indiana polylactic
polyglycolic acid PLGA lactel85/15 polyDL DL-lactideco-glycolide
Birmingham Polymers Birmingham Alabama collagen ialuronico acid
idrossiapatite commercially available preparations PLGA matrix
polyglycolic 15% polylactic acid 200–300lm pore size laboratory
Collagraft product mixture porous beads 60% idrossiapatite 40%
tricalcium phosphate bovine cartilage Helistat collagen bovine deep
tendon purest sources Type I collagen size defect repair 5mm ·
5mm · 2mm deep matrix material size samples material weighn order to
determine an average weight material weights matrix materials
standardize samples collagen 2mg ialuronico acid mg idrossiapatite
mg PLGA mg collagen ialuronico acid idrossiapatite sterile
manufacturer sterilized irradiation prepared PLGA matrici
sterilized initial h 100% etanolo consecutive % etanolo PLGA matrici
sterile phosphate saline method sterilization methods sterilization
etanolo broth matrici sterile sterile materials individual wells
96-well culture plate Preparation material positive pressure hood
contamination material triplicate bacterium Bacterial strains
bacteria study S aureus ATCC 29923 S epidermidis ATCC 12228
emolitico Streptococco ATCC 19615 P aeruginosa ATCC 27853 organisms
common laboratory organisms susceptibility patterns strains strains
grown aerobically 37 blood agar plates BBL Media Becton–Dickinson
Microbiology Systems inoculum 15 · 108 organisms per milliliter
Mueller–Hinton broth optical density measurement solutions stock
solution bacteria species concentration organisms milliliter
Experimental setup experiment run in triplicate matrix material
bacteria combination material sample inoculated bacterial stock
solutions Separate bacterial matrix matrix broth bacteria run
microliter samples bacterial plated blood agar plates starting
number bacteria milliliter blood agar plates 96-well plates
incubated 37_C aerobic conditions 5% CO2 course experiment
Determination batteriostatiche activity antimicrobial effect
various biomateriali count viable bacteria exposure biomateriali
Sample collections experimental cultures made loop used inoculate
blood agar plates procedure repeated giving total inoculation sample
wells sample stirred sterile loop lawn effect bacteria material
samples colony count plates incubated 24h P aeruginosa accurate
colony count growth plates surpassed ability count number colony
units CFUs number CFUs number organisms millilitre batteriostatiche
properties growth sample containing matrix material bacteria
bacteria Batteriostatiche inhibition bacterial growth experimental
condition Statistical analysis mean three measurements experimental
condition outcome value Estimates growth curves statistical
analysis regression analysis Growth curves separately bacterial
type matrix treatment combination regression possibility linear
quadratic term experimental condition bacteria type treatments
intercept regression equations model determined graphical
examination observed predicted values treatment types
correlation calculated P aeruginosa analysis values ability count
CFUs bacteria analysis percent growth suppression determined
area under growth curves condition compared bacteria end point
analysis area under growth curve end-point growth measure rate
growth average rate suppression bacteria strains calculated data
weighting individual strains bacteria used analysis t test
against experimental conditions Statistical significance pResults discussion strains not exposed to matrix exhibited normal
growth curves fastest growth rate doubling time approximately 73min
slowest growth doubling time approximately no cross-contamination
bacteria bacterial cultures viable during period evaluated end
analysis matrix no bacteria free of bacterial growth during
materials sterile experiment assessment bacterial growth presence
matrix materials illustrated materials growth exposure matrix
materials exhibited purely bactericidal bacterial strains growth
culture varying degrees matrix materials batteriostatiche suppression
P aeruginosa time point times growth bacteria ability materials
growth bacterial counts cultures matrix materials impacted
tissue-engineered grafts integration ospite tissue surface ospite
cells surface charge surface morphology chemical structure pH
osmotic pressure ionic concentration area surrounding implant
microenvironment material surface ospite cells bacteria bacteria
implantation batteriostatiche biomateriali partially suppress growth
patogeni adequate immune response ospite batteriostatiche
biomatrice clinically significant infection construct materials
batteriostatiche properties inhibition suppression cellular matrix
materials intestinal submucosa urinary bladder submucosa
antimicrobial activity density proteins surface bioactive glass
antimicrobial activity Porphyromonas gingivalis Actinomyces naeslundii
Streptococco mutans Streptococco sanguis timeframes implantation
natural defense colonization oral cavity saturation enzyme
hyluronate physical enzymatic b-elimination process extracellulare
matrix bacterial degradation pneumonia sepsis liquid media
cell-associated fractions circulating enzyme bacterial invasion lyase
bacteria elevated levels tissue permeability chains sieve spread
bacteria calcium phosphate ceramic displayed significant
batteriostatiche effects manufacturing processing negatively charged
surface adhesion proliferation rate bacteria attributed electrostatic
interaction cell surface surface Suppression material charge ions
ling material amount material overwhelming number bacteria
inoculation Collagen I tissue engineering ability incorporate type I
collagen matrix regenerate bone Collagen growth b-emolitico
Streptococco S epidermidis mechanism suppression growth S aureus
collagen adhesion molecule directed cna gene bacteria PLGA matrici
growth bemolitico Streptococco P aeruginosa PLGA acidic environment
conducive growth bacteria mechanism suppression S aureus unknown
summary ialuronico acid patogeni ortopedici practice PLGA exhibited
bacteriostasis actually accelerated growth b-emolitico Streptococco P
aeruginosa idrossiapatite collagen batteriostatiche level
suppression dependent individual bacteria Selection biomatrice
batteriostatiche beneficial promoting tissue-engineered graft survival
patients susceptible infection wound contamination tissue loss local
ischemia studies time course initial concentrations bacteria
bacterial strains including anaerobic bacteria Soluzione satura di
tiosolfato di sodio temini statistici varianza tra gruppi varianza
entro gruppi
